土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,对土壤样品进行DNA提取时,需要考虑样品来源的二氧化硅对DNA的结合,一旦DNA与样品来源的二氧化硅发生结合,DNA就会随着土壤固体颗粒物质一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通过多种方法提取DNA,并用于PCR检测、STR分型检测、二代测序分析;但是,尿液中DNA含量较低,尿液浸润土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要针对土壤尿液进行DNA提取,具有一定难度。 技术实现要素: 本发明为解决上述存在的问题,提供了一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,其解决技术问题的技术方案是: 土壤尿液DNA提取试剂盒,包括以下试剂:有授权的土壤DNA提取公司有哪几家?松江区土壤基因组土壤DNA提取联系电话
解决方案应对以上难点?MP Biomedicals:MP有三款试剂盒可供选择。产品:提取方式、裂解介质、样本类型、样本硬度、去杂提纯、操作耗时。FastDNA Spin Kit:玻璃奶法、介质A、植物样本、艰难样本、高效提纯、需一定时间。需一定时间:柱膜法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、省时简便。FastDNA Spin Kit for Soil:玻璃奶法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、需一定时间。解决方案:解决方案1:当作植物样本看待,选择Fas松江区FastDNA SPIN土壤试剂盒土壤DNA提取联系人土壤DNA提取助力药物研发。
磨介质Lysing Matrix E,含有三种不同材质和直径的研磨珠,能有效裂解难以破碎的革兰氏阳性菌、***等微生物;√ 配备对核酸高特异性的结合磁珠,减少对杂质的吸附,提高核酸吸附载量;√ 采用独特的抑制物去除技术,使用去杂剂*需一步去除蛋白、多糖、胆汁盐等杂质;明显提高提取DNA的A260/A230比值。产品特点:浓:FastPrep"仪器搭配研磨珠技术,保证提取浓度高。纯:独特的抑制物去除技术,提高A260/A230,保障提取纯度好提取的DNA可
。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加买土壤DNA提取就找益启生物。
与现有技术相比,本发明技术克服了样品土壤来源的二氧化硅对DNA的吸附,从而减少了不必要的DNA损失,可达到获取高质量、高产量土壤尿液DNA目的。 附图说明 图1是本发明实施例1中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图2是本发明实施例2中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图3是本发明实施例3中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图4是本发明实施例4中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 具体实施方式 下面将结合本发明的附图,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。上海益启土壤DNA提取批发价。闵行区土壤DNA提取试剂盒土壤DNA提取联系电话
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8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)松江区土壤基因组土壤DNA提取联系电话
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